Contract nr: 5900/18.09.2006
Contract nr: 5900/18.09.2006
Cod proiect: 178
Denumirea Proiectului: Modelarea oscilatiilor calciului intracelular induse de bacteria patogena E.Coli in celulele renale
Denumirea Proiectului ENG: “Modeling the intracellular calcium oscillations induced by the pathogenic bacteria E. Coli in renal cells”
Perioada: 2006-2008
Contractor: CENTRUL INTERNATIONAL DE BIODINAMICA
Reprezentant autorizat: Director CSI Xx Xxxxx Xxxxxxxxx
Director de proiect : Xx . Xxxxxxxxxxx Xxxxxx
REZUMATUL PROIECTULUI
Proiectul “Modelarea oscilatiilor calciului intracelular induse de bacteria patogena E.coli in celulele renale” a avut ca scop modelarea concentratiei Ca2+ intracelular, in speta oscilatiilor Ca2 in celulele renale (MDCK si LLC-PK) in conditiile expunerii celulelor renale la toxina α-haemolizina produsa de bacteria E.coli. Studiile s-au facut prin compararea oscilatiilor de Ca2+ spontane cu cele induse de toxina bacteriei patogene.
In prima faza a proiectului am facut observatii experimetale asupra oscilatiilor spontane de Ca2+ aparute in celule renale si am facut un model al acestora. Prin metoda de microscopie TIRF am observat oscilatiile de Ca2+ intracelular in conditiii normale candcomparativ cu situatia cand asupra celulelor nu se actioneaza prin nici un stimul extern. Am extins cercetarile si asupra celulelor renale derivate din nefronul proximal (LLC-PK) pentru a compara rezultatele.
Oscilatiile “spontane” de Ca2+ se observa in celulele renale MDCK si LLC-PK atunci cand mediul exterior este saracit in ioni de calciu. S-a observat aparitia de oscilatii spontane de Ca2+ datorate variatiilor calciului intracelular din depozitele sensibile la inozitol-trifosfat. Studiile sugereaza ca relevanta fiziologica a oscilatiilor spontane de Ca2+ este bioritmicitatea celulara datorata unui “oscilator de Ca2+“ implicat in sinteza ADN, proliferarea si cresterea celulara. Am refacut experimentele pe cellule renale folosind TIRF-ul pentru a vizualiza modificarile celulei date de absenta Ca2+ din mediu extracelular.
Pe baza experientei membrilor echipei am realizat o dubla observare a oscilatiilor Ca2+ prin microscopie de fluorescenta, iar pe de alta parte interpretarea datelor obtinute folosind camera Ussing si crearea unui model care sa permita prelucrarea semnalelor obtinute prin ultima metoda.